Бактериальный определитель Берги Определитель Берджи. Группы бактерий определителя Берджи. Определитель Берджи систематизирует все известные бактерии по нашедшим в практической бактериологии наибольшее распространение принципам идентификации

Фиксированные препараты используют для окрашивания с подробным изучением морфологических и некоторых биохимических параметров патогенов. Каплю бактериального состава размазывают по предметному стеклу и фиксируют пламенем горелки или специальными химическими составами.
Для определения свойств бактериальных препаратов используют ряд общих и специфических методик:
микроскопия – определение формы, размеров, окрашивания по Граму;
биохимические методы – исследование ферментативной способности микроорганизма к расщеплению тех или иных углеводов, аминокислот, метаболитов, в том числе способность к гемолизу, фибринолизу при попадании в кровь живых существ;
серологические методы идентификации – реакции агглютинации под воздействием специфической сыворотки и другие антигенные свойства;
биологические методы – заражение лабораторных ждивотных с проверкой патогенности и токсигенности взятых образцов, их устойчивости к антибиотикам.
Стандартный результат сводится к двум пунктам анализа:
качественный анализ с определением факта наличия/отсутствия определенного возбудителя;
количественный анализ с указанием числа микроорганизмов на единицу объема – выражают в КОЕ (колониеобразующие единицы).
Базовые санитарно-микробиологические методы направлены на определение общей микробной обсеменённости (общее микробное число), определение и титрование СПМ, выявление в исследуемых объектах патогенных микроорганизмов и их метаболитов, определение степени недоброкачественности изучаемых объектов или продуктов, вызванной деятельностью микробов. Практическая санитарная микробиология использует два основных метода оценки са-нитарно-эпидемического состояния внешней среды: прямое обнаружение патогенных микроорганизмов и выявление косвенных признаков пребывания патогенов во внешней среде.
Методы прямого обнаружения — наиболее точные и надёжные критерии оценки эпидемиологической опасности внешней среды. Наиболее часто проводят посев исследуемого материала на питательные среды. Однако на ожидаемые результаты исследований влияют следующие факторы. • Содержание патогенных микроорганизмов во внешней среде относительно невелико, так как они составляют лишь 1/30 000 всего видового состава микрофлоры внешней среды. При этом патогенная микрофлора распределена во внешней среде неравномерно, что делает необходимым проведение серийных исследований в динамике определённого периода. • Выделение одного патогенного микроорганизма далеко не всегда свидетельствует о присутствии других патогенных видов. Указанное делает необходимым проведение разнонаправленных исследований, что практически сложно осуществимо. Ситуацию значительно усугубляет возрастание роли условно-патогенных микроорганизмов, способных вызвать эпидемические вспышки заболеваний.

Нарушение санитарно-гигиенических правил изготовления, транспортировки, хранения продуктов питания может привести к их контаминации патогенными и условно-патогенными микроорганизмами, что способствует возникновению пищевых инфекций и отравлений. Патогенные микроорганизмы попадают на пищевые продукты, в воду, почву, воздух из выделений больных людей и животных, а также из выделений бактерио- и вирусоносителей. Индикация патогенных бактерий из объектов внешней среды вызывает ряд трудностей, так как они присутствуют в объектах среды в низких концентрациях и их наличие не удается зафиксировать в межэпидемические периоды. Для их обнаружения и культивирования требуются довольно сложные питательные среды, а работу с патогенными микроорганизмами должны осуществлять специально подготовленные специалисты. Показателями санитарного неблагополучия объектов внешней среды избраны в том числе микроорганизмы, постоянно обитающие в организме человека и теплокровных животных (толстом отделе кишечника и верхнем отделе дыхательных путей). Они являются комменсалами и проявляют условно-патогенные свойства лишь при изменении условий. Эти микроорганизмы и были названы санитарно-показательными. Санитарно-показательные микроорганизмы должны отвечать следующим требованиям: • постоянно содержаться в выделениях человека и теплокровных животных во внешнюю среду в больших количествах; • после выделения сохранять жизнеспособность в течение времени, близкого к срокам выживаемости патогенных микробов; • не размножаться в окружающей среде и не изменять свои биологические свойства; • не зависеть от присутствия других микроорганизмов, которые способны подавлять или стимулировать их рост; • быть достаточно типичными, чтобы их дифференциальная диагностика не вызывала затруднений. Причем методы идентификации СП МО должны быть простыми, доступными и экономичными. БГКП. Понятие БГКП утилитарное (санитарно-бактериологическое и экологическое), но не таксономическое. Группа БГКП представлена микроорганизмами родов Esherichia, Citrobacter, Enterobacter, Serratia, Klebsiella, экологические особенности которых определяют их индикаторную значимость. Это грамотрицательные, не образующие спор, короткие палочки, сбраживающие глюкозу и лактозу с образованием кислоты и газа при 37,0 + 0,5°С в течение 24—48 ч, не обладающие оксидазной активностью. ОКБ (общие колиформные бактерии) — это грамотрицательные оксидазонегативные палочки, которые на среде Эндо расщепляют лактозу при 37°С в течение 48 ч. Род Escherichia включает типовой вид Е. coli и служит показателем свежего фекального загрязнения. Для идентификации Е. coli используют биохимические тесты, учитывая способность к ферментации лактозы при 44,0 ± 0,5°С и отсутствие роста на цитратсодержащих средах. Обнаруженных в воде представителей рода Escherichia относят к термотолерантным колиформным бактериям, в лечебных грязях — к фекальным колиформным бактериям, в пищевых продуктах — к Е. coli. Кишечная палочка не является идеальным санитарно-показательным микроорганизмом. Недостатки кишечной палочки как СП МО: обилие аналогов во внешней среде; изменчивость во внешней среде; недостаточная устойчивость к неблагоприятным воздействиям; недостаточно длительное выживание в продуктах по сравнению с шигеллами Зонне, сальмонеллами, энтеровирусами; способность к размножению в воде; нечеткий индикатор в отношении присутствия сальмонелл. Бактерии рода Citrobacter доказательно обнаружены при эпидемических вспышках, протекающих по типу диспепсий, гастроэнтероколитов, пищевых токсикоинфекций. Энтерококки (Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium) имеют следующие преимущества. Преимущества энтерококка как СП МО: постоянно находится в кишечнике человека и животных; постоянно выделяется во внешнюю среду; Е. faecalis в основном обитает в кишечнике человека; Е. faecium обнаруживается в кишечнике животных, хотя сравнительно редко также отмечается и Е. faecalis faecalis; не способен размножаться во внешней среде; не изменяет своих свойств во внешней среде; не имеет аналогов во внешней среде; устойчив к неблагоприятным воздействиям внешней среды. К хлору энтерококк в четыре раза устойчивее по сравнению с кишечной палочкой. Благодаря этому признаку энтерококк используют при проверке качества хлорирования воды, а также как индикатор качества дезинфекции. Он выдерживает температуру 60°С, что позволяет применять его как показатель качества пастеризации. Может быть использован в качестве индикатора при исследовании соленых продуктов, морской воды, так как по сравнению с кишечной палочкой устойчив к растворам, имеющим концентрацию поваренной соли 6,5—17%, в которых кишечная палочка гибнет или становится атипичной. Устойчив к pH в диапазоне 3—12, что делает его индикатором фекального загрязнения при исследовании кислых продуктов. Для индикации энтерококков разработаны высокоселективные среды. Показателем свежего фекального загрязнения воды в настоящее время узаконена энтерококкометрия. При обнаружении в воде атипичных кишечных палочек присутствие энтерококков становится главным показателем свежего фекального загрязнения. В настоящее время узаконена энтерококкометрия молока, котлет в целях выяснения эффективности их термической обработки. Протей. Бактерии рода Proteus встречаются в 98% случаев в выделениях из кишечника человека и животных, из них в 82% случаев — это Р. mirabilis. На загрязнение объектов разлагающимися субстратами указывает обнаружение протея в воде и продуктах, что свидетельствует о крайнем санитарном неблагополучии. При обнаружении протея в пищевых продуктах их бракуют, а воду не разрешают употреблять для питья. Clostridium perfringens. У С. perfringens как СП МО есть свои достоинства и недостатки: • не постоянно обнаруживается в кишечнике человека; • длительно сохраняется во внешней среде за счет спорообразования, поэтому не свидетельствует о свежем фекальном загрязнении; • погибает от действия сопутствующей микрофлоры; • имеет споры, устойчивые к концентрациям активного хлора 1,2—1,7 мг/л воды; • может служить косвенным показателем наличия в воде энтеровирусов. Для прорастания спор клостридий необходим температурный шок (прогревание при 75°С в течение 15—20 мин). Определение титра С. perfringens рекомендовано при текущем санитарном надзоре за состоянием территории. Тесты на обнаружение сульфитре- дуцирующих клостридий в воде предусматривают стандарты России, Румынии, США. Определение С. perfringens проводят в воде открытых водоемов, почве, лечебных грязях, мясных продуктах.