Tibbiy, kimyoviy va biokimyoviy tadqiqotlar uchun laboratoriya tayyor santrifugasi.
Tezlik sentrifugalarini maksimal tezligi 25 ming aylana va 89 ming g gacha tezlashadi. Rotor va sentrifuga namunalari bo'lgan kamera, yuqori tezlikda rotor aylanish paytida ishqalanish yuzaga keladigan isitish oldini olish uchun sovutish tizimi bilan jihozlangan. Odatda, bunday sentrifuga 1.5 litrgacha bo'lgan hajmda ishlaydi va burchak rotorlari yoki almashtiriladigan stakan rotorlar bilan jihozlangan.
Preparativ ultrasentrifugalar 75000 aylanaga tezlashadi va maksimal markazdan 510 ming g tezlashadi. Ular rotorning havo ishqalanishidan ortiqcha qizib ketishining oldini olish uchun sovutish va vakuum qurilmalari bilan jihozlangan. Ushbu sentrifuga uchun rotorlar yuqori quvvatli titan yoki alyuminiy qotishmalaridan tayyorlangan. Ultrasentrifugalar, yuqori tezlik va preparativlardan farqli o'laroq, rotor muvozanati buzilgan taqdirda tebranishni kamaytirish uchun moslashuvchan bo'ladi. Rotordagi sig'imlar grammning o'ndan biriga qadar ehtiyotkorlik bilan muvozanatlangan bo'lishi kerak.
Amaliy mashg’ulot - 4
Mavzu: Membranaviy fraksiyalarni ajratish yo‘llari. Nodestruktiv ajratish usullari. To‘qima va xujayralarning buzish (yemirish) yo‘llari. Hujayralarni fraksiyalash (guruhlash). Oqsillarni gel-filtratsiya usulida fraksiyalash.
Oqsillarni ajratish va tozalash usullari.Oqsillar ajratish uchun operatsiyalar ketma-ketligi, odatda, biologik materiallar, oqsillarni qazib olish (ya'ni, bir erigan holatda ularni o'tkazish) silliqlash uchun kamayadi va nihoyat, boshqa oqsillar, ya'ni tozalash va individual oqsil aralashmasidan olinadi. Barcha operatsiyalar 0°C ga yaqin haroratda amalga oshiriladi va denaturatsiyani oldini olish uchun kuchli kislotalar va bazalarni ishlatmaydi.
Dastlabki biologik materiallar pichoq yoki pistil homogenizatorlar yordamida eziladi, ko'pincha rulonli yoki to'p tegirmonlari ishlatiladi. Bundan tashqari, muz kristallaridan kelib chiqqan hujayra membranasining yorilishiga olib keladigan halokatli ta'sirga asoslangan muqobil muzlatish va to'qimalarni eritish usuli qo'llaniladi. Ultratovush, press-usuli va yuqori bosim ostida azot bilan hujayralarni to'ldirish iborat "azot bomba" usuli, va keyin bosim keskin tushirish sifatida ishlatiladi, to'qimalarning -hujayralarni "portlash" go'yo azotli gaz.
Protein molekulalari orasidagi oqsillar va lipidlar o'rtasidagi hidrofobik o'zaro ta'sirlarini buzadigan moddalar - ezilgan mato 8-10% tuz eritmalari, bufer aralashmalari, organik erituvchilar va neion bo'lmagan detergentlar sifatida ekstragent bilan quyiladi. Biroq, ular oqsillarning uchinchi ( to'rtinchi) tuzilishini buzmaslik uchun ehtiyotkorlik bilan ishlatiladi. Organik birikmalardan glitserinning suvli eritmalari va saxarozaning zaif eritmalari qo'llaniladi. Bufer aralashmalarning fosfat, sitrat, borat bufer aralashmalarning sifatida, kislota va zaif ishqoriy o'rta hissa oqsillarni tarqatib yuborish va barqarorlashtirish. To'qimaning erimaydigan qismlari sentrifugalanadi. Cho'kindi usti suyuq eruvchan oqsillarni o'z ichiga oladi.
Barcha oqsillar shunga o'xshash xususiyatlarga ega va ularning bo'linishi turli oqsillar xususiyatlari kichik farqlarga asoslangan, chunki, boshqa oqsillardan individual oqsilni ajratish asosiy qiyinchilik.
Do'stlaringiz bilan baham: |