Штамм Bacillus subtilis 12 В

АНТАГОНИСТИЧЕСКАЯ АКТИВНОСТЬ ШТАММА В ОТНОШЕНИИ ПАТОГЕННЫХ И УСЛОВНО-ПАТОГЕННЫХ БАКТЕРИЙ.
Для определения специфической активности штамма исследовали антагонистическую активность в отношении тест культур патогенных микроорганизмов, вызывающих заболевания животных. Исследование осуществляли методом отсроченного антагонизма. Для этого культуру штамма высевали петлей в центре чашки Петри с агаризованной средой Гаузе N2. Посевы инкубировали в термостате при 37 С в течение 72 часов. Затем к выросшей культуре подсевали штрихом тест-микроорганизмы (500-миллионные суспензии суточных культур в физиологическом растворе). Учет результатов проводили через 18 ч инкубирования при 37 С по величине зон отсутствия роста тест-культур. Контролем роста тест-культур служило параллельное выращивание их на чашках с агаризованной средой Гаузе N2 без культуры исследуемого штамма. Полученные данные результатов испытания представлены в таблице 1.
Таблица 1.
Спектр антагонистической активности штамма Bacillus subtilis 12B с разным содержанием живых бактериальных клеток

Тест –культуры	Зоны задержки роста (мм) тестовых штаммов, мм
	1х10^8 кл/мл	5х10^8	1х10^9	5х10^9	10х10^9
1	2	3	4	5	6
Shigella sonne 2586	12-15	12-15	15-20	15-20	18-20
Shigella HK	20-25	20-25	25-30	25-30	28-30
Proteus mirabilis 40	15-20	15-20	20-25	20-25	25-27
P. mirabilis 36	15-18	15-18	15-20	15-20	18-20
P. mirabilis 35	15-20	15-20	20-25	20-25	22-25
Proteus vulgaris 12	10-12	10-12	15-18	15-20	17-20
1	2	3	4	5	6
P. vulgaris 48	12-15	12-15	15-20	15-20	17-20
P. vulgaris 41	10-12	10-12	15-20	15-20	18-22
Pseudomonas aeruginosa 126	15-20	15-20	15-20	15-20	15-20
P. aeruginosa 8	12-15	12-15	15-20	15-20	15-22
Escherihia coli 154	12-15	12-15	15-20	15-20	18-25
E. coli 140	12-15	12-15	15-20	15-20	15-20
Streptococcus 321	10-15	10-15	15-18	15-18	15-18
Streptococcus 325	12-15	12-15	15-20	18-20	18-20
Streptococcus 191	10-12	10-12	15-20	15-20	15-20
Staphylococcus aureus 66	15-16	15-16	15-18	20-25	20-22
St. aureus 67	8-10	8-10	10-15	10-15	12-15
St. aureus 80	12-15	12-15	15-20	15-20	17-20
Paratyhv 269	12-15	12-15	18-20	18-20	17-20
Paratyhv 15	15-20	15-20	20-25	20-25	22-25
Hexaere II 1230	22-25	22-25	25-30	25-30	28-30

Как следует из данных таблицы культура штамма Bacillus subtilis 12B характеризуется высокой антагонистической активностью в отношении широкого спектра патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, вызывающих инфекционные заболевания у животных.
ИЗУЧЕНИЕ ЧУВСТВИТЕЛЬНОСТИ ШТАММА BACILLUS SUBTILIS 12B К АНТИБИОТИКАМ.
Широкий спектр антагонистической активности позволяет рекомендовать пробиотики на основе штамма Bacillus subtilis 12B вместо антибиотиков для вытеснения патогенной микрофлоры, особенно при острых кишечных инфекциях.
В отличии от готовых антибиотиков, к споровым пробиотикам не возникает привыкания и не вырабатывается устойчивости у болезнетворных микроорганизмов, поскольку бациллы продуцируют не отдельные антибиотики, а «семейства» пептидных антибиотиков сходных по базовой структуре, но отличающихся по концевым группировкам. Антибиотическое действие их оказывается разнообразным, а формирование устойчивых вариантов микроорганизмов замедленным (Филин В.А. и др., 1998).
Преимущество химически-синтезированных антибиотиков - в скорости терапевтического эффекта, антибиотики действуют быстрее. Поэтому в острый период заболевания, как правило, ветеринары не могут отказаться от антибиотиков и в первые 1-2 дня назначают одновременно и антибиотики и пробиотики на основе сенной палочки, но сокращают срок дачи антибиотика до 1-2-3 дней, в зависимости от состояния. При невозможности использовать антибиотики (непереносимости или неэффективности имеющихся антибиотиков) можно использовать только пробиотик, но повысить дозу в 5-10 раз в первые 3 дня лечения, поскольку пробиотики, как правило, безвредны.
Поскольку в некоторых случаях лечения инфекционных заболеваний необходимо одновременное назначение антибиотика и пробиотика проведено изучение чувствительности штамма Bacillus subtilis 12B к антибиотикам.
Определение чувствительности штамма к антибиотикам изучали диско-диффузионным методом, используя стандартне диски, пропитанные антибиотиками. Штамм высевали на агаризованную питательную среду и раскладывали диски с антибиотиками, по 5 на чашку Петри. Посевы инкубировали при 37 50 0С в течение 24 ч. Чувствительность культур к антибиотикам выражали в мм диаметра зон задержки роста. Резистентными считали штаммы, зоны задержки роста которых составили - (0-5) мм; малочувствительными (6-10) мм чувствительными - (11-20) мм; высокочувствительными – более 22 мм. Результаты исследования представлены в таблице 2.
Из данных таблицы следует, что штамм B. subtilis 12B обладает широкой устойчивостью к антибиотикам, в том числе : линкомицину, тетрациклину, мономицину, полимиксину, оксациллину, стрептомицину, ампицилину, бензилпенициллину.
Таблица 2

№	Антибиотики	Зона задержки роста, мм
	эритромицин	8-10
	олеандомицин	10-12
	карбенициллин	18-20
	линкомицин	6-8
	левомицитин	20-22
	тетрациклин	6-9
	мономицин	8-10
	полимиксин	0
	оксациллин	0
	ампициллин	0
	гептомицин	10-15
	неомицин	6-8
	цепарин	15-20
	канамицин	10-15
	новограмон	20-25
	5-НОК	20-25
	бисенгиол	10-15
	тобрамицин	0
	клафоран	15-20
	бензилпенициллин	0
	рифампицин	8-10
	гентамицин	8-10
	стрептомицин	0
	ристомицин	8-10
	доксициклин	10-12

Препарат-пробиотик на основе штамма Bacillus subtilis 12B можно назначать одновременно с антибиотиками к действию которых он проявляет устойчивость, без существенного снижения активности препарата.