ajralish mexanizmiga ko'ra HPLC USULLARINING TASNIFI. HPLC tomonidan amalga oshiriladigan ajralishlarning ko'pchiligi moddalarning sorbent bilan o'zaro ta'sirining aralash mexanizmiga asoslangan bo'lib, bu ustundagi komponentlarning ko'proq yoki kamroq saqlanishini ta'minlaydi. Ko'proq yoki kamroq sof shaklda ajratish mexanizmlari amalda juda kam uchraydi, masalan, aromatik uglevodorodlarni ajratish uchun mutlaqo suvsiz silikagel va suvsiz geksan ishlatilganda adsorbsiya.
Turli tuzilmalar va molekulyar og'irlikdagi moddalarni aralash ushlab turish mexanizmi bilan adsorbsiya, taqsimlash, chiqarib tashlash va boshqa mexanizmlarning ushlab turishga qo'shgan hissasini baholash mumkin. Biroq, HPLCda ajratish mexanizmlarini yaxshiroq tushunish va tushunish uchun ma'lum bir turdagi xromatografiya bilan bog'liq bo'lgan u yoki bu mexanizmning ustunligi bilan ajralishlarni ko'rib chiqish tavsiya etiladi, masalan, ion almashinuvi xromatografiyasi.
2.1.1 ADSORPSIYON XROMATOGRAFIYASI Adsorbsion xromatografiya bilan ajratish moddaning sirtida faol markazlarga ega bo'lgan silikagel yoki alyuminiy oksidi kabi adsorbentlar bilan o'zaro ta'siri natijasida amalga oshiriladi. Turli namuna molekulalarining adsorbsion markazlari bilan o'zaro ta'sir qilish qobiliyatidagi farq ularning kolonna orqali harakatlanuvchi faza bilan harakat qilish jarayonida zonalarga bo'linishiga olib keladi. Bu holda erishilgan komponent zonalarini ajratish erituvchi va adsorbent bilan o'zaro ta'sirga bog'liq.
Gidroksil guruhlarga ega bo'lgan adsorbent yuzasida sorbsiya adsorbentning qutb yuzasi va molekulalarning qutbli (yoki qutblanadigan) guruhlari yoki hududlari o'rtasidagi o'ziga xos o'zaro ta'sirga asoslanadi. Bunday o'zaro ta'sirlarga doimiy yoki induksiyalangan dipollar orasidagi dipol-dipol o'zaro ta'sir, n-komplekslar yoki zaryad o'tkazuvchi komplekslar hosil bo'lgunga qadar vodorod bog'ining hosil bo'lishi kiradi. Amaliy ishda mumkin bo'lgan va tez-tez uchraydigan xemisorbtsiyaning namoyon bo'lishi, bu ushlab turish vaqtini sezilarli darajada oshirishga, samaradorlikning keskin pasayishiga, parchalanish mahsulotlarining paydo bo'lishiga yoki moddaning qaytarilmas sorbsiyasiga olib kelishi mumkin.
Moddalarning adsorbsion izotermalari chiziqli, qavariq yoki botiq shaklga ega. Chiziqli adsorbsion izoterma bilan moddaning cho'qqisi simmetrik bo'ladi va ushlab turish vaqti namuna hajmiga bog'liq emas. Ko'pincha moddalarning adsorbsion izotermalari chiziqli bo'lmagan va konveks shaklga ega, bu esa quyruq shakllanishi bilan tepalikning ba'zi assimetriyasiga olib keladi.
Har xil g'ovak hajmlari, sirtlari va gözenek diametrlari bo'lgan silika jel adsorbentlari HPLCda eng katta qo'llanilishini topadi. Alyuminiy oksidi kamroq qo'llaniladi va juda kamdan-kam hollarda klassik ustun va yupqa qatlamli xromatografiyada keng qo'llaniladigan boshqa adsorbentlar. Buning asosiy sababi boshqa adsorbentlarning ko'pchiligining mexanik mustahkamligining etarli emasligi bo'lib, bu ularni qadoqlash va yuqori bosimli suyuqliklar uchun xos bo'lgan yuqori bosimlarda ishlatishga imkon bermaydi.
Adsorbsiya uchun mas'ul bo'lgan va silikagel va alyuminiy oksidi yuzasida joylashgan qutbli guruhlar o'xshash xususiyatlarga ega. Shuning uchun, odatda, moddalar aralashmalarining elyusiya tartibi va erituvchilarning eluotropik qatori ular uchun bir xil bo'ladi. Biroq, silika jeli va alyuminiy oksidining kimyoviy tuzilishidagi farq ba'zan selektivlikdagi farqlarga olib keladi - keyin ushbu aniq vazifa uchun ko'proq mos keladigan u yoki bu adsorbentga ustunlik beriladi. Masalan, alyuminiy oksidi ma'lum polisiklik aromatik uglevodorodlarni ajratishda ko'proq selektivlikni ta'minlaydi.
Odatda aluminaga nisbatan silikagelga ustunlik berish g'ovaklik, sirt va teshik diametri bo'yicha silikagellarning kengroq tanlovi, shuningdek aluminaning sezilarli darajada yuqori katalitik faolligi bilan bog'liq bo'lib, bu ko'pincha tahlil natijalarining buzilishiga olib keladi. namuna komponentlarining parchalanishi yoki ularning qaytarilmas kimyosorbsiyasi tufayli. .
