Anaeroblarni kulturalash usullari,
Anaerob bakteriyalarni suniy ozuqa
muhitida o’stirish uchun kislorodsiz sharoit hosil qilish kerak.
Buning uchun
fizikaviy, ximiyaviy va biologik usullar qo’llaniladi. Anaerotsat yoki eksikatordan
havoning bunday haydalishini ‘irogalol yordamida ximiyaviy yo’l bilan kislorodni
biriktirish vositasida xosil qilish mumkin: biologik yo’l bilan Fortner usuli
yordamida ya'ni kislorodsiz sharoitni aerob va anaerob bakteriyalarni birga germetik
yo’iq
‘etri
kosachasida
ekilganda
xosil
qilinadi.
BIRINCHI KUN: Bakteriyalardan toza kultura olish uchun tekshiriluvchi material
Kitt. Tarotsi muhitli ‘robirkaga ekiladi. Muhit ekishdan oldin suv xammomida 10-
20 minut davomida (havoni kislorad aralashmasidan ajratish uchun qizdiriladi, so’ng
termotsatda 37 °C da o’tsiriladi).
IKKINCHI KUN:
Ekilma kuzatiladi, surtma tayyorlab Gramm usulida bo’yaladi.
Musbat bo’lsa, muhitda loyqalanish, gaz ‘ufakchalari va surtmada yirik s’orali
grammusbat tayoqchalar kuzatiladi. Toza kultura ajratish
uchun Kitt - Tarotsi
muhitidan material olib, ilmoqchada birinchi ‘etri kosachasiga - qonli agarga ekiladi
va muhitning yuqori qismida sh’atel bilan tahsimlanadi. Xuddi shu sh’atel bilan
material muhitga ikkinchi va uchinchi kosachaga alohida koloniya xosil kilish uchun
suriladi.
UCHINCHI KUN: Chashkada o’tsirilgan koloniya lu’a yordamida o’rganiladi va
hosil bo’lgan koloniyani ‘robirkaga solib, termotsatga qo’yiladi.
Aniqlanuvchi
bakteriyalarning morfologik, kultural va bir ximik xususiyatlari o’rganiladi. Kitta -
Tarotsi muhiti anaeroblarni kulturalashda universal muhit xisoblanadi. U qonli
bulon, hayvon to’qima bo’lagidan iborat. Anaerob sharoit hosil qilish uchun muhit
utsiga serillangan o’simlik moyi quyiladi.
a) Havoni haydash - kislorodni muhitdan mexanik yo’l bilan haydash. Buning uchun
maxsus asboblar (anaerotsatlar) yordamida - havo haydab chaqiriladi.
b) Havo kislorodidan mexanik himoyalanish - Buning uchun Vinyal-Vaysen usuli
qulay. 30
sm uzunlikdagi, 3-6 mm kenglikdagi shisha naychaning bir tomoni
ka’illyarga
solinadi, boshqa tomoni esa ‘axtali ‘robirkaga quyiladi va
tekshirilayotgan material ilitilgan agarga ekiladi. So’ng
aralashtirilib, serillangan
trubaga solinadi. Aralashma ka’ilyarga quyiladi va truba termotsatga quyiladi.
v) Biologik usul - aerob va anaerob kulturalarni bir yerga ekish (Fortner usuli). 2ga
bo’lingan ‘etri kosachasiga qalin qatlam qonli agarga ekiladi. Sterillangan skalpel
bilan chashka o’rtasidan bo’linadi.
Agarning
birinchi yarmiga aerob, ikkinchi yarmiga anaerob kulturasi ekiladi.
Chashka ‘arafin bilan to’ldiriladi va termotsatga qo’yiladi. Avval kislorodga
to’yingan aeroblar o’sib chiqadi, so’ng aeroblar o’sadi.
Do'stlaringiz bilan baham: